EXPERIMENTOS DE CRUZA

La Drosophila resulto ser un material experimental ideal para el trabajo que realizamos.

Todo experimento de cruza debe ser previamente planificado, anotando el genotipo y fenotipo de los individuos a cruzar, lo que se espera obtener en F1, en F2 y en la cruza de prueba de la F1. Estos datos constituirán luego los "resultados esperados".

Una vez establecidos los cultivos, deben vigilarse diariamente hasta la aparición de las primeras pupas; en ese momento se retiran los adultos que han dado origen al cultivo.

Al término de un experimento, cuando se ha completado el cuadro de datos, se procede a elaborar los resultados: los TOTALES obtenidos para cada FENOTIPO corresponden a los "resultados observados"; junto con las frecuencias correspondientes a los "resultados esperados", se confecciona un cuadro para aplicar un test de hipótesis (normalmente se utiliza Chi-Cuadrado).

Se utilizarán las siguientes mutaciones: BAR" (L) produce el  fenotipo cuerpo Largo, Alas Largas (A) "bar" (l) cuerpo corto, Alas Cortas (a). Donde  la primera está formada por dos cromosomas iguales (XX) denominadas Autosomas y la segunda está formada por un cromosoma (X) y otro (Y), denominada cromosoma sexual.

Normalmente se planifican cruzas recíprocas, esto significa preparar dos frascos por cada cruzamiento, del siguiente modo: 1) hembras mutantes x machos normales y 2) hembras normales x machos mutantes. Esto permite controlar la influencia que el sexo puede tener sobre la herencia del carácter en estudio. No es necesario cuando se cruza F1 x F1 para obtener F2, en el caso en que exista un solo fenotipo en F1.

Ejemplo: se realizo un cruce de especies Drosophila Melanogaster que tienen: 

Cuerpo Largo (L)        Cuerpo Corto (l)

Alas Largas (A)         Alas Cortas (a)

P1-     L L A A         l l a a

        

G1-      LA LA          x    la la

F1

Macho/Hembra	LA	LA
la	LlAa	LlAa
la	LlAa	LlAa

Resultados:

Fenotipo 100%	Cuerpo Largo, Alas Largas.
Genotipo 100%	Heterocigoto Dominante.

P2-      L l A a            L l A a

G2- LA La lA la    x    LA La lA la

F2

Macho/Hembra	LA	La	lA	la
LA	LLAA	LLAa	LlAA	LlAa
La	LLAa	LLaa	LlAa	Llaa
lA	LlAA	LlAa	llAA	llAa
la	LlAa	Llaa	llAa	llaa

Resultados:  

        

	Genotipos	Posición	Fenotipos
Homocigoto Dominante:	LLAA	1/16	9/16 cuerpo largo, Ala largas
Heterocigoto Dominante	LLAa	2/16
	LlAA	2/16	3/16 cuerpo largo, alas cortas
	LlAa	4/16
	LLaa	1/16
	Llaa	2/16	3/16 cuerpo corto, Alas largas
	llAA	1/16
	llAa	2/16
Homocigoto Recesivo	llaa	1/16	1/16 cuerpo Corto, alas cortas

      

CONCLUSIÓN 

Durante la realización de esta práctica se logro ampliar los conocimientos previos expuestos por Gregorio Mendel, mediante el planteamiento de las leyes y los principios de la transmisión de los caracteres hereditarios. Al mismo tiempo y gracias al refuerzo de la mosquita “Drosophila Melanogaster”, conseguimos extraer los resultados esperados bajo los parámetros  estipulados al momento de hacer los  cruces con dichas mosquitas.

Después de observar y conocer las características morfológicas externas, conseguimos identificar los fenotipos y las diferencias que existen tanto en las hembras como en los machos.

Al obtener los análisis de resultado nos permitieron identificar las diferentes etapas en el ciclo vital de esta especie, conociendo el porqué de estos cambios y entendimos aun más la importancia del estudio de las generaciones a medida que va transcurriendo el tiempo:

CICLO DE VIDA DE LAS DROSOPHILA

   Manejo de drosophila melanogaster

DENTIFICACIÓN DEL SEXO DE LAS MOSCAS ADULTAS

Varias diferencias morfológicas permiten distinguir de las hembras de Drosophila.

1.- El extremo del abdomen es alargado en la hembra y algo redondeado en el macho.

2.- La distribución de bandas oscuras en los segmentos abdominales permite distinguir a ambos sexos sin necesidad de usar microscopio. El abdomen de la hembra tiene 7 segmentos y el macho 5.

3.- Los machos de las Drosophilas poseen el llamado peine sexual, un cepillo de más o menos 10 gruesas cerdas negras ubicadas en la superficie distal de la articulación tarsal del primer par de patas.

Debe tener cuidado cuando se utiliza la pigmentación como criterio único para distinguir los sexos, ya que las moscas recién nacidas la pigmentación aún no se ha completado. Un macho recién nacido es tan descolorido como una hembra y puede confundirse.

SEPARACIÓN DE HEMBRAS VÍRGENES

En la mayoría de los casos es necesario separar hembras vírgenes cuando se realiza los cruzamientos. Afortunadamente las hembras no copula sino hasta 8 horas después de haber emergido de la pupa. Por lo tanto, la forma más simple y segura es separar vírgenes es descartar todas las moscas que han nacido en la botella de cultivo. A las 8 horas se observa nuevamente la botella de cultivo, se separan las hembras de los machos que han nacidos durante ese lapso de tiempo, todas ellas son vírgenes y pueden ser guardadas en frascos de cultivo con alimento.

INSTRUCCIONES PARA EL MANEJO DE LAS MOSCAS

Para el manejo y observación de Drosophila es necesario anestesiarlas. Para ello, coloque una gota de éter en una mota de algodón envuelto en gasa que se encuentra en el tapón de la botella que se usa como anestesiador. Deje que el éter difunda en el frasco un minuto. En seguida, golpee a las moscas contra el fondo del frasco de cultivo a utilizar, saque el tapón de gasa. Luego invierta rápidamente el frasco y colóquelo sobre la boca de eterificador. Golpee nuevamente y observe el paso de las moscas hacia el eterificador.

Cuando el medio de cultivo es demasiado blando, no invierta el frasco de cultivo, sino que coloque la boca del eterificador encima del frasco.

Observe a las moscas en el anesteciador. Cuando ellas se suelte de la pared del frasco, déjelas por 15 seg. más y entonces páselas a la placa de recuento.

No trate de trabajar con muchas mosca de una vez en su placa. Las moscas pueden ser movidas en la placa usando el pincel fino. Si las moscas comienzan a despertar en la placa, ellas deben ser reanestesiadas.

Itroduccion a experimentos con mosca del vinagre:

Dropshila melanogaster

introducción:

La mosca drosóphila o mosca del vinagre es una mosca pequeña de 1-2 mm, su aspecto es de un color ocre y sus ojos son generalmente de color rojo. Su vuelo es lento y la podemos localizar fácilmente en frutas muy maduras en proceso de descomposición o cerca de recipientes abiertos que contengan vinagre o vino. Es ideal para pequeños peces que necesitan alimento vivo, como por ejemplo los ciprinodóntidos (killis), o juveniles de otros mayores.

Su ciclo de desarrollo depende en mayor medida de la temperatura, siendo de una media de 10-15 días acortándose bastante en verano. Las fases de desarrollo pasan por la fase de huevo, que una mosca adulta ha depositado en un medio apropiado (papilla) y ya a los pocos días podemos ver como diminutos gusanos que van recorriendo el recipiente alimentándose de esta papilla (si por ejemplo usamos gelatina de fresa en la composición, podremos ver sus estómagos llenos y de color rojo). A los pocos días estos se sitúan a media altura de las paredes del recipiente donde pasan a la fase de pupa, permaneciendo en este estado unos días hasta que se completa la metamorfosis en su interior y sale al exterior la mosca. Esta a los pocos minutos ya vuela e inicia de nuevo el ciclo.

Recipiente para el cultivo:

Lo mejor es disponer de dos botes para que en caso de que uno se malogre o se infecte de ácaros (se ven como unos puntitos negros), podamos disponer de otro cultivo sano con el que reiniciar un nuevo cultivo.

Los botes idóneos son los de las galletitas saladas, que son de aproximadamente 1.5 litros y la tapa no es de rosca. Les haremos un agujero en la tapa para ventilación, de 1 cm de diámetro y prepararemos una gasa de malla fina para tapar los agujeros cuando las moscas estén dentro.

Papilla alimenticia para las moscas:

La papilla alimenticia más sencilla se compone principalmente de:

-fruta madura que nos sobre de nuestro frigorífico, son muy buenas para esto la manzana, pera y especialmente el plátano.

-azúcar.

-un producto que nos espese la mezcla, puede ser gelatina o puré de patatas en copos. Yo prefiero usar los copos de puré ya que se obtiene una pasta más blanda.

-vinagre o levadura de panadería. Estos son para evitar que se produzcan hongos en el interior del recipiente.

-opcionalmente se puede añadir un complejo vitamínico, cereales o germen de trigo.

Se trituran las frutas y se mezclan con los copos del puré de patatas y un par de cucharadas de azúcar y se añade un poco de agua caliente hasta obtener una masa compacta. La vertemos en cada bote rellenando aproximadamente 1-1,5cm del fondo, cuidando de no ensuciar las paredes del bote y los dejaremos enfriar. Para finalizar espolvoreamos la levadura o añadiremos unas gotas de vinagre por encima de la papilla.

Sustancias que producen mutaciones geneticas:

Benzopireno: El benzopireno es un hidrocarburo policíclico aromatico potencialmente carcinógeno, que se encuentra en el cigarro. En especial, el a-benzopireno es uno de los derivados de mayor factor de riesgo, tras largos periodos de consumo, puede desencadenar desórdenes celulares produciendo cáncer. Una sustancia química hallada en los cigarros es la responsable de que aparezcan mutaciones en un gen llamado RAS, que pertenece a una familia de genes responsable del control del crecimiento y desarrollo de las células.

                        ingeneria genetica en la mosca de la fruta:

Manipulación de los genes Pax6

Experimentos en la mosca de la fruta, desmotaron que, la producción de Pax 6 conllevaba a la producción de ojos en cualquier parte del cuerpo (ojos ectopicos) de la mosca de la fruta. Concerniente a este aspecto que parece un mutante aberrante, existe un hecho extraño y extremadamente fascinante.

“Mediante el uso de diferentes líneas de fortalecimiento genético, fuimos capaces de producir ojos ectopicos en piernas, alas y antenas; y ensayos electrofisiológicos demostraron que los ojos ectopicos generados en las antenas generan un electroretinograma normal, lo que indica que, ¡los ojos ectopicos de la antena eran funcionales!” (Gehring et al 1999). “El énfasis es mío”

Figura 7. Mosca con ojos ectópicos en las antenas

Figura 8. Mosca con Ojos ectópicos en las patas.

Otros experimentos se basaban en introducir el gen Pax del ratón en los primordios de la mosca, y  sorpresa, producían ojos ectopicos, pero no de ratón si no de mosca (Gehring al 1999). Lo que indica claramente que este Gen emitía la orden de construir un ojo, pero no determinaba nada sobre cual ojo. Otros genes homólogos a Pax6 procedentes del tunicado Phallusia y de los calamares Loligo también son capaces de producir ojos ectopicos en la mosca de la fruta (Gehring et al 1999). 

blog biologia, experimentos con drosophila melanogaster (mosca del vinagre)

- Aquí os adjunto varias cosas sobre las moscas del vinagre o de la fruta : su cultivo, curiosidades , etc  :

http://www.acuariofilia.net/foros/generico-agua-dulce/38886-como-conseguir-moscas-de-la-fruta.html

http://www.lamarabunta.org/videos/cria%20de%20drosophila%20por%20miguel%20guerrero(seca).pdf