jueves, 14 de noviembre de 2013

   Manejo de drosophila melanogaster
DENTIFICACIÓN DEL SEXO DE LAS MOSCAS ADULTAS
Varias diferencias morfológicas permiten distinguir de las hembras de Drosophila.
1.- El extremo del abdomen es alargado en la hembra y algo redondeado en el macho.
2.- La distribución de bandas oscuras en los segmentos abdominales permite distinguir a ambos sexos sin necesidad de usar microscopio. El abdomen de la hembra tiene 7 segmentos y el macho 5.
3.- Los machos de las Drosophilas poseen el llamado peine sexual, un cepillo de más o menos 10 gruesas cerdas negras ubicadas en la superficie distal de la articulación tarsal del primer par de patas.
Debe tener cuidado cuando se utiliza la pigmentación como criterio único para distinguir los sexos, ya que las moscas recién nacidas la pigmentación aún no se ha completado. Un macho recién nacido es tan descolorido como una hembra y puede confundirse.
SEPARACIÓN DE HEMBRAS VÍRGENES
En la mayoría de los casos es necesario separar hembras vírgenes cuando se realiza los cruzamientos. Afortunadamente las hembras no copula sino hasta 8 horas después de haber emergido de la pupa. Por lo tanto, la forma más simple y segura es separar vírgenes es descartar todas las moscas que han nacido en la botella de cultivo. A las 8 horas se observa nuevamente la botella de cultivo, se separan las hembras de los machos que han nacidos durante ese lapso de tiempo, todas ellas son vírgenes y pueden ser guardadas en frascos de cultivo con alimento.
INSTRUCCIONES PARA EL MANEJO DE LAS MOSCAS
Para el manejo y observación de Drosophila es necesario anestesiarlas. Para ello, coloque una gota de éter en una mota de algodón envuelto en gasa que se encuentra en el tapón de la botella que se usa como anestesiador. Deje que el éter difunda en el frasco un minuto. En seguida, golpee a las moscas contra el fondo del frasco de cultivo a utilizar, saque el tapón de gasa. Luego invierta rápidamente el frasco y colóquelo sobre la boca de eterificador. Golpee nuevamente y observe el paso de las moscas hacia el eterificador.
Cuando el medio de cultivo es demasiado blando, no invierta el frasco de cultivo, sino que coloque la boca del eterificador encima del frasco.
Observe a las moscas en el anesteciador. Cuando ellas se suelte de la pared del frasco, déjelas por 15 seg. más y entonces páselas a la placa de recuento.
No trate de trabajar con muchas mosca de una vez en su placa. Las moscas pueden ser movidas en la placa usando el pincel fino. Si las moscas comienzan a despertar en la placa, ellas deben ser reanestesiadas.


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